PRACTICA Nº.3

RECUENTO DE PLAQUETAS

OBJETIVO:

Que el alumno aprenda a contar correctamente las plaquetas. 

INTRODUCCIÓN:

Las plaquetas son los elementos formes mas pequeños de la sangre, actúan en la hemostasia y en el mantenimiento de la integridad vascular, además de participar en el proceso de la coagulación sanguínea.

Las plaquetas son difíciles de contar debido que son pequeñas y deben distinguirse de los restos celulares. Otra fuente de dificultad reside en su tendencia de adherirse al cristal, a cualquier cuerpo extraño y en particular unas de otras.

Para el conteo de plaquetas se utiliza oxalato de amonio como diluyente y se cuenta en los mismos cuadros para glóbulos rojos y el resultado se multiplica por 1000.

MATERIAL Y REACTIVOS:

·         Pipeta de Thoma para glóbulos blancos

·         Microscopio

·         Cámara de Neubauer

·         Caja de Petri con papel filtro

·         Oxalato de amonio al 1%

·         Sangre venosa con EDTA

PROCEDIMIENTO:

1.       Mezclar la sangre perfectamente.

2.      Aspirar la muestra hasta la marca 0.5

3.      Limpiar con gasa el exceso de sangre y aspirar oxalato de amonio hasta la marca 11.

 

4.      Mezclar de 3 a 5 min, desechar las 3 primeras gotas y llenar las cuadriculas de la cámara de Neubauer.

 

5.      Dejar sedimentar de 10 a 15 min. La cámara en una caja Petri con un disco de papel filtro húmedo en el fondo para evitar la evaporación.

6.      Enfocar la cámara y contar las plaquetas en los mismos cuadros para glóbulos rojos empleando el objetivo 40X.

7.      Las plaquetas contadas se multiplican por 1000 para obtener el número de plaquetas por mm.

VALOR DE REFERENCIA:

            150 000 - 450 000 / mm3

RESULTADOS:

MUESTRA 1

251 000

MUESTRA 2

358 000

CONCLUSIÓN:

A través de esta práctica, recordamos cómo se lleva a cabo dicha práctica y saber cuáles son los valores de referencia de la misma, al igual como contar correctamente las plaquetas en la camara de Neubauer.              

Vo.Bo. DEL PROFESOR

DR.VICENTE MARTÍNEZ FRAGOSO

PRACTICA Nº.2

TINCIÓN DE WRIGHT

Solución colorante poli cromática para la tinción diferencial de la mayoría de las estructuras de sangre así como algunos de sus parásitos, por el método de Wright. Uso exclusivo de diagnóstico in vitro.

REACTIVOS:

1.- Colorante de Wright.

2.- Buffer de Fosfato.

PROCEDIMIENTO:

Se procede a realizar un frotis sanguíneo por medio de punción venosa.

Colocar la placa con la extensión hacia arriba en una gradilla de tinción.

La extensión se cubre con 1-2 ml del colorante durante 3 o 4 minutos.

Agregar suavemente Buffer de Fosfatos en la misma cantidad que el colorante y mezclar soplando sobre la superficie pero evitando derrames. Dejar de 8 a 10 minutos hasta que aparezca una escarcha metálica.

Quitar el colorante con agua destilada en forma horizontal, luego tomando la placa en forma vertical, continúe el lavado hasta que haya desaparecido toda la coloración azul.

Secar al aire en la posición vertical sobre papel absorbente.

RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS

INTRODUCCIÓN:

El recuento diferencial de leucocitos consiste en reconocer y valorar las proporciones relativas de las distintas variedades de glóbulos blancos que se observan en el frotis teñido de sangre.

Al conocer la proporción de células sanguíneas que están presentes en el torrente sanguíneo cualquier trastorno patológico que altere el sistema hematopoyético podría verse reflejado un cambio de la proporción de una especie celular. Para el recuento diferencial se tiene que observar un mínimo de 100 leucocitos.

Hay varios métodos de recuento diferencial de leucocitos pero el más utilizado es el de almena y en línea.

MATERIAL Y REACTIVOS:

1.       Frotis sanguíneo teñido.

2.      Microscopio.

3.      Aceite de inmersión.

4.      Un contador de células.

PROCEDIMIENTO:

1.       Se coloca el frotis en el microscopio y se enfoca.

2.      Se le agrega una gota de aceite de inmersión y se observa con el objetivo de 100X

3.      Si el recuento se hace en línea se empieza en el borde del frotis hasta el otro borde  en línea paralela hasta contar 100 leucocitos.

4.      Se van contando los mononucleares (monocitos y linfocitos) y los polimorfo nucleares (neutrófilos, basófilos y eosinófilos) según su morfología.

5.      Se reportan en % (valor relativo) o en valor absoluto (mm³).

VALORES DE REFERENCIA:

	ADULTOS	NIÑOS
LINFOCITOS	20-55%	20-50%
MONOCITOS	2-6%	0-9%
EOSINOFILOS	1-5%	0-8%
BASOFILOS	0-1%	0-1%
NEUTROFILOS	45-70%	20-60%
BANDAS	0-5%	1-6%

RESULTADOS:

LINFOCITOS: 47%

MONOCITOS: 3%

EOSINOFILOS: 3%

BASOFILOS: 0%

NEUTROFILOS: 64%

BANDAS: 2%

CONCLUSIÓN:

Gracias a esta práctica pudimos abordar más sobre LA TINCIÓN DE WRIGHT Y EL RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS ya que través de esta práctica podemos reconocer y valorar las distintas variedades de leucocitos que se observan en el frotis teñido de sangre.

Vo.Bo. DEL PROFESOR

DR.VICENTE MARTÍNEZ FRAGOSO